کلونینگ ژن HER2 در وکتور بیانی (+Hygro( 1.pcDNA3 برای بیان گیرنده های HER2 در سطح سلول های یوکاریوتی (LL2)

مقدمه سرطان فرآیند پیچیده و چند مرحلهای است که با تغییرات سلولی مختلف همراه است؛ سرطان سینه، پنجمین عامل شایع مرگ در سراسر دنیاست و در بین زنان شایع ترین عامل مرگ ناشی از سرطان است. عوامل محیطی و ژنتیکی متفاوتی در سرطان سینه دخالت دارند. اما جهش در یکی از ژن های خاص به نام HER2 منجر به سرطان سینه میشود. هدف از این مطالعه کلونینگ ژن گیرندههای HER2 در وکتورهای بیانی pcDNA3. 1( Hygro+) و بیان این وکتور نوترکیب در سلولهای یوکاریوتی LL2 است. این سلولها میتوانند برای ایجاد مدلهای موشی سرطان سینه استفاده شوند.مواد وروشهاتوالی HER2 انسان با استفاده از پرایمرهای طراحی شده تکثیر گردید. محصولات PCR و وکتور بیانی pcDNA3.1( Hygro+) با آنزیمهای محدودالاثر HindIII و XhoI برش زده شدند. محصولات لیگاسیون با روش لیپوفکشن به درون سلولهای سرطانی LL2 انتقال داده شدند.نتایجتوالی ژن HER2 (دومن خارج سلولی، درون غشایی و درون سلولی) با موفقیت تکثیر و در درون وکتور بیانی pcDNA3.1( Hygro+) کلون گردید تا بدین وسیله گیرنده HER2 در سلولهای یوکاریوتی LL2 بیان شود.نتیجه گیریاین وکتور بیانی(pcDNA3.1( Hygro+ نوترکیب میتواند برای ایجاد سلولهای LL2 که گیرنده HER2 را در سطح خودشان بیان میکنند، استفاده گردد.