ورود
مقالات فارسیISIکنفرانسهاژورنالها

تکثیر و همسانه سازی ژن آلفا توکسین باکتری کلوستریدیوم پرفرینجنس در باکتری E. coli

محل انتشار: فصلنامه بیوتکنولوژی کشاورزی، دوره: 11، شماره: 4
سال انتشار: 1398
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 387

فایل این مقاله در 20 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:
https://civilica.com/doc/1006695

شناسه ملی سند علمی:

JR_JOAGK-11-4_005

تاریخ نمایه سازی: 18 فروردین 1399

چکیده مقاله:

اهداف: هدف از انجام این پژوهش، تکثیر و همسانه­سازی شکل کامل و همچنین بخش ابتدایی ژن کشنده آلفا­­توکسین (α-Toxin) باکتری کلستریدیوم پرفرینجنس با اندازه­های به ترتیب 1100 و 750 جفت باز با استفاده از ناقل بیانی pET28a در باکتری E.coli بود. مواد و روش­ها: استخراجDNA  ژنومی با استفاده از کیت کیاژن صورت گرفت. آغازگرهای جلوبرنده و برگشت در آزمایشگاه طراحی و در ناحیه ابتدایی آغازگرها ردیف­های آنزیم­های برشگر HindIII و XhoI مطابق با ناحیه کلونینگ پلاسمید مورد نظر اضافه گردید. قطعات ژنی مورد نظر با روش PCR معمولی تکثیر و در ناقل pET28a با کمک روش شوک حرارتی کلون شدند. استخراج DNA پلاسمیدی با استفاده از روش لیز قلیایی صورت گرفت. نتایج: نتایج ژل الکتروفورز محصولات PCR، تکثیر واضح و واحد شکل کامل و همچنین بخش ابتدایی قطعات ژنی مورد نظر را مطابق با اندازه های مورد انتظار نشان داد. بعلاوه با استفاده از آزمایش هضم آنزیمی منفرد و دوگانه توسط آنزیم های برشگر HindIII و XhoI همسانه سازی ژنهای آلفا­توکسین در باکتری میزبان و تولید باکتریهای نوترکیب تایید شد. نتیجه­گیری:  با توجه به موفقیت آمیز بودن دقیق کلونینگ ژنهای آلفا­توکسین در باکتری­های بیانی میزبان، می­توان گفت که پرایمرهای طراحی شده در این تحقیق برای تکثیر ژن آلفا­توکسین بسیار اختصاصی بوده و به عنوان مارکر شناسایی و طبقه بندی این باکتری­ها می­توانند استفاده واقع شوند. همچنین با ساخت احتمالی واکسن­های نوترکیب ژنتیکی مهندسی­شده می­توان کنترل و مقابله با پاتوژن­های مهمی همچون باکتری کلستریدیوم پرفرینجنس را امکان­پذیر ساخت.

کلیدواژه ها:

نویسندگان

حسینعلی ساسان

گروه زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه شهید با هنر کرمان، کرمان، ایران

مهین رسانی

دانشجوی کارشناسی ارشد، بخش مهندسی علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید با هنر کرمان،

سمانه کارآموز

دانشجوی کارشناسی ارشد، بخش مهندسی علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید با هنر کرمان،

علی اسماعیلی زاده کشکوئیه

دانشگاه شهید باهنر کرمان

مراجع و منابع این مقاله:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :
  • کرمی علی (1381) مقدمه ای برواکسنهای ژنی.تهران انتشارات دانشگاه امام ...
  • ناصری فر راضس، غفاری فر فاطمه، دلیمی اصل عبدالحسین، شریفی ...
  • Ahsani MR, Bafti MS, Esmailizadeh AK, Mohammadabadi MR (2011) Genotyping ...
  • Ahsani MR, Mohammadabadi MR, Shamsaddini MB (2010) Clostridium perfringens isolate ...
  • Anuradha K, Foo HL, Mariana NS Loh TC et al. ...
  • Claudia EAF, Viviane N, Edison LD, Mario JV (2003) Prevalence ...
  • Evy G, Stefanie V, Bonnie V, Bart P (2016) The ...
  • Frank M (2004) Clostridial Diseases of Cattle and Sheep: Text ...
  • Hadizadeh M, Mohammadabadi MR, Niazi A et al. (2013) Use ...
  • Hadizadeh M, Niazi A, Mohammad Abadi M et al. (2014) ...
  • Jia-Ning B, Yang Z, Bao-Hua Z (2006) Cloning of α-β ...
  • Karami A (2001) Introduction to Genetic Vaccines. Imam Hossein Publications, ...
  • Marcos R, Ferreira A, Gustavo MSGM, Carlos EPC et al. ...
  • Mohammadabadi MR (2017) Role of Clostridium perfringens in pathogenicity of ...
  • Negahama M (2013) Vaccines against Clostridium perfringens alpha-toxin. Curr Pharm ...
  • Naserifar R, Ghaffarifar F, Dalimiasl A, Sharifi Z (2010) Cloning ...
  • Navarro MA, McClane BA, Uzal FA (2018) Mechanisms of Action ...
  • Neeson BN, Clark GC, Atkins HS, Lingard B et al. ...
  • Naqpal R, Oqata K, Tsuji H, Matsuda K et al. ...
  • Oda M, Kabura M, Takagishi T, Suzue A et al. ...
  • Oda M, Kihara A, Yoshioka H, Saito Y et al. ...
  • Oda M, Yutaka T, Jun S, Masahiro N (2015) Membrane-Binding ...
  • Radhika B, Kumar NV, Sreenivasulu D (2016) Detection of Clostridium ...
  • Sakurai J, Negahama M, Oda M (2004) Clostridium perfringens Alpha- ...
  • Sakurai J, Negahama M, Oda M, Tsuge H et al. ...
  • Sasan H (2007) Cloning and expression of aerolysin and metalloprtease ...
  • Sasan H (2010) Cloning of EprA1 gene of Aeromonas hydrophila ...
  • Schoepe H, Neubauer A, Schlapp T, Weiler LH et al. ...
  • Shahdadnejad N, Mohammadabadi MR, Shamsadini M (2016) Typing of Clostridium ...
  • Shimizu T, Ohtani K, Hirakawa H, Yamashita A et al. ...
  • Siu-Tong L and Ming KL (2012) A middle-aged lady with ...
  • Stevens DL, Titball RW, Jepson M, Bayer CR et al. ...
  • Williamson ED, Titball RW (1993) A genetically engineered vaccine against ...
  • Zandi E, Mohammadabadi MR, Ezzatkhah M, Esmailizadeh AK (2014) Typing ...
  • Yuan T, Ming W, Bin L, Jianzhong C et al. ...
    • نمایش کامل مراجع