انگشت نگاری ژنومی مایکوباکتریوم بویس سویه AN5 مورد استفاده در تولید توبرکولین گاوی با استفاده از تکنیک RFLP
صاحب اثر: سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی
نوع محتوی: طرح پژوهشی
زبان: فارسی
استان موضوع گزارش: البرز
شهر موضوع گزارش: کرج
شناسه ملی سند علمی: R-1056679
تاریخ درج در سایت: 27 بهمن 1397
دسته بندی علمی: علوم کشاورزی
مشاهده: 180
تعداد صفحات: 34
سال انتشار: 1391
نسخه کامل طرح پژوهشی منتشر نشده است و در دسترس نیست.
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
چکیده طرح پژوهشی:
به منظور داشتن 10 نسل متوالی ده پاسا بر روی لوله های حاوی محیط کشت اختصاصی لوانشتاین جانسون پیروات دار((LJP انجام شد و لوله ها به مدت 2 ماه در انکوباتور 37 درجه نگهداری گردید. از کلونی های رشد یافته هر لوله یک لوپ کامل باکتری استحصا ل و پس از غیر فعال سازی در دمای 80 درجه سانتی گراد عملیات استخراج DNA انجام گرفت .پس از ارزیابی کمی و کیفی DNA استخراج شده، هضم آنزیمی با استفاده از دو آنزیم PvuII و AluI به مدت یک شبانه روز در دمای 37 درجه سانتی گراد انجام گردید.در مرحله بعد انتقا ل DNA هضم شده بر روی آگارز %1 پروسه انتقال DNA از روی ل آگارز برروی ممبران با شار مثبت با تکنیک مویینگی انجام شد(ساترن بلاتینگ).سپس DNA منتقل شده بر روی نایلون در دمای120 درجه سنتیگراد به مدت 20 دقیقه تثبیت گردید وپس از عملیات هیبریداسیون با کمک پروب های PGRS و DR، نهایتا" ممیرین حاصل با استفاده از NBT و BCIP رنگ آمیزی گردید. نتایج به دست آمده بیانگر وجود الگوهای مشابه در تمامی نسل های مورد بررسی در DNA هضم شده با آنزیمهای فوق بوده و هیچ گونه تفاوتی در تعداد باندها یا سایز ملکولی آنها مشاهده نشد.