بررسی ایمنی زایی آنتی ژن های فیمبری (F5)، توکسین (St) و پیکره کامل باکتری E.coli K99
صاحب اثر: سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی
نوع محتوی: طرح پژوهشی
زبان: فارسی
استان موضوع گزارش: البرز
شهر موضوع گزارش: کرج
شناسه ملی سند علمی: R-1092156
تاریخ درج در سایت: 27 بهمن 1397
دسته بندی علمی: علوم کشاورزی
مشاهده: 328
تعداد صفحات: 51
سال انتشار: 1392
نسخه کامل طرح پژوهشی منتشر نشده است و در دسترس نیست.
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
چکیده طرح پژوهشی:
در بین عوامل متعدد، باکتری اشریشیاکلی دارای اهمیت قابل توجهی در ایجاد اسهال می باشد. . اگر چه سویه های خاصی از اشریشیاکلی با ایجاد اسهال مرتبط می باشند، اما سویه های انتروتوکسیژنیک اشریشیاکلی (ETEC ) باکتری غالب ایجاد کننده ی اسهال در گوساله ها است. این سویه با داشتن دو فاکتور کلنیزاسیون و انتروتوکسین مقاوم و حساس به حرارت باعث اسهال آبکی می شود. هدف از مطالعه حاضر تهیه آنتی ژن های پیکره کامل باکتری E.coli K99، انتی ژن خالص K99، توکسین و همچنین مخلوط پیکره و آنتی ژن خالص و سپس ارزیابی ایمنی زایی آنها در رت و گوسفند می باشد. پس از کشت باکتری در محیط مینکا و غیر فعال سازی با PBS شستشو داده شد و پیکره کامل تهیه گردید. آنتی ژن خالص K99 نیز پس از تهیه این آنتی ژن با روش حرارت و سپس استفاده از ستون کروماتوگرافی تبادل یونی، آنتی ژن خالص بدست آمد. محلول رویی کشت باکتری در محیط حاوی کازامینو اسید و بردن بر روی ژل اکریل آمید و برش باندهای مربوط به توکسین از روی ژل نیز برای خالص سازی ناقص توکسین بکار رفت. از مخلوط پیکره کامل و آنتی ژن خالص K99 هم به همین منظور استفاده گردید. پس از تزریق هر کدام از این محلول ها به رت و گوسفند و خونگیری از آنها بوسیله تست الیزا میزان ایمنی زایی آنها ارزیابی شد. نتایج تیتر سرمی تزریق به رت اخلاف معنی داری بین گروه توکسین دریافت کرده و سایر گروهها بدست داد. همین نتایج در مورد گوسفند نیز صادق بود. بدین صورت که بین گروههای مختلف آنتی ژن خالص فیمبری K99، پیکره کامل باکتری و مخلوط پیکره و آنتی ژن K99 اختلاف آماری معنی داری بدست نیامد اما این گروه ها با گروه دریافت توکسین اخلاف آماری معنی داری داشت.آنتی ژن K99 نقش اساسی در بیماری زایی گوساله ها دارد زیرا به عنوان فاکتور غالب در باکتری انتروتوکسیژن گاو است لذا این آنتی ژن در ارزیابی ایمنی نیز حایز اهمیت است. این آنتی ژن باعث چسبیدن باکتری به مخاط روده می شود. بنابر این محلول غیر فعال شده حاوی این آنتی ژن می تواند مانع چسبیدن باکتری و جلوگیری از تکثیر غیر طبیعی آن شود. در مطالعه حاضر استفاده از آنتی ژن کامل پیکره باکتری با توجه به در دسترس بودن و هزینه تهیه، بهترین نتیجه را در ایمنی زایی بدست داد. واژگان کلیدی: ایمنی زایی، آنتی ژن K99، توکسین، پیکره کامل باکتری اشریشیاکلی K99