تراریختی گیاه سیب زمینی جهت مقاومت به ویروس PVY با استفاده از مکانیسم RNAi

استفاده از مکانیسم های ایجاد مقاومت ناشی از پاتوژن افق های جدیدی در راستای تولید گیاهان تراریخت مقاوم به ویروس باز کرده است. این نوع مقاومت ناشی از ویروس در گیاهان تراریخت از طریق بیان بخشی از ژنوم خود ویروس ایجاد می شود. یکی از بیماری های مهمی که سالانه خسارت های اقتصادی بسیاری به کشاورزان کشور وارد می کند و باعث افت عملکرد و کیفیت محصول می گردد، ویروسY سیب زمینی است. این پژوهش در راستای تولید سیب زمینی تراریخت مقاوم به ویروس PVY با استفاده از مکانیسم خاموشی ژن انجام گردید. بدین منظور یک سازه ژنی برگرفته از بخش 3′UTR و پروتئین پوششی (cp) ژنوم ویروس PVY طراحی گردید. سازه با استفاده از اگروباکتریوم به ریز نمونه های میانگره، برگ و ریزغده انتقال داده شدند. درصد نو ساقه های تولید شده در محیط باززایی بانشانگر انتخابی علف کش فسفینوتریسین (PPT) پس از رشد و تکثیر مورد ارزیابی قرار گرفتند. تراریختی بوته ها با استفاده از آزمون زنجیره ای پلیمراز(PCR) بررسی گردید. بر اساس نتایج PCR ا40 درصد گیاهان باززا شده تراریخت بودند. پس از رسیدن به حداکثر رشد رویشی استخراج RNA انجام گردید. بیان ژن barدر گیاهان تراریخت با استفاده از آزمون RT-PCR مورد بررسی قرار گرفت. 20 گیاه تراریخت واجد سازه RNAi به منظور ارزیابی مقاومت به PVYبا آزمون الیزا مورد ارزیابی قرارخواهند گرفت.