طراحی آنالوگ سیستئینی اریتروپوئتین نوترکیب انسانی به منظور پگیلاسیون اختصاصی

بطور وسیع در درمان کم خونی استفاده میشود. اما به دلیل نیمه عمر کم، (rhEPO) مقدمه: اریتروپوئتین نوترکیب انسانی 2 بار آن را تزریق نمود. ثابت - مصرف آن به عنوان دارو محدود شده است زیرا برای رسیدن به اثرات درمانی باید هفتهای 3 شده است پگیلاسیون باعث افزایش نیمه عمر پلاسمایی پروتئینها میشود. از اینرو به عنوان یک روش بهبود خواص فارماکوکینتیکی پروتئینهای نوترکیب مورد توجه قرار گرفته است. هدف: هدف از مطالعه، ساخت اریتروپوئتین پگیله شده است که دارای خواص فارماکوکینتیکی بهتری باشد. اریتروپوئتین ساخته و وارد حامل بیانی شد. cDNA روش: ابتدا آنالوگ سیستئینی توسط روش جهشزایی نقطهای از رویشد و به روش تکثیر با متوترکسات، کلونهای با بیان بالا CHO/dhfr- سپس این سازه به روش لیپوفکشن وارد سلولهای انتخاب شدند. در ادامه روش کروماتوگرافی تمایلی برای خالص سازی آنالوگ سیستئینی استفاده شد. سپس پگیلاسیوناختصاصی با مالئیمید- پلیاتیلنگلیکول ، از طریق سیستئین آزاد جایگزین شده انجام شد. سرانجام پس از خالص سازی مطالعه شد. UT توسط ژل فیلتراسیون ، فعالیت زیستی آنالوگ پگیله شده بروی رده سلولی 7 نتیجه: نتایج نشان داد که آنالوگ پگیله شده دارای فعالیت زیستی مناسبی بود. به عبارت دیگر، جایگزین کردن سیستئین ویا اتصال پلیاتیلنگلیکول اثر منفی بر فعالیت زیستی آن نداشته است.